Feed Planet Magazine Issue-Sayı: 26 September/October - Eylül/Ekim 2020

COVER STORY • KAPAK DOSYASI 28 FEED PLANET / SEPTEMBER - OCTOBER 2020 • EYLÜL - EKİM 2020 lemeli matrisler için 10 μg kg-1'e kadar başarıyla doğrulanmıştır. Avrupa Bir- liği gerekliliklerine göre ta- nımlama analit/matris kom- binasyonlarının %90'ının fazlasında sağlandı ve ta- nımlama oranlarının daha da artırılması için önerilerde bulunuldu. Herbisitler Enzim bağlı immüno- sorbent deneyi (ELISA) ELISA yöntemlerinde, bir numunenin ayrı ayrı bile- şenleri analizden önce ay- rılmaz. Bireysel kimyasal tehlikelerin doğru tespiti ve ölçümü, antikorların spesi- fik olarak tek tek bileşikleri hedefleme yeteneğine bağ- lıdır. ELISA yöntemlerinin kullanımı nispeten basittir ve birden fazla numune özütünün aynı anda belirlen- mesini sağlar. (Şekil 4). Doğrudan, dolaylı, rekabetçi ve sandviç ELISA'lar dâhil olmak üzere çok çeşitli yöntemler mevcuttur. Küçük moleküller için ticari ELISA'ların büyük bir kısmı, örneğin bir numuneden alınan toksinin, mik- rotitre plakta sınırlı sayıda immobilize antikor için etiketli bir toksinle (toksin-enzim konjugatı gibi) re- kabet ettiği rekabetçi bir format kullanır. Bağlanmamış herhangi bir toksini veya etiketli toksini uzaklaştırmak için yıkadıktan ve substratın eklenmesinden sonra, ikincisi, renkli bir ürün üret- mek için etiketli toksinle ilişkili enzimle reaksiyona girer. Prosedürün rekabetçi doğası göz önüne alındı- ğında, numune çukurları içindeki renk yoğunlukları, numunelerdeki toksin konsantrasyonuyla ters oran- tılıdır ve bir plaka okuyucu kullanılarak kolorimetrik olarak doğru ve eşzamanlı olarak ölçülebilir. Birden fazla numune tipik olarak 96 oyuklu bir mikrotitre plak kullanılarak aynı anda ölçülür. Evcil hayvan yemlerinde yaygın olarak kullanılan bir herbisit olan glifosatın belirlenmesi, enzim bağ- fied within the second mass analyser. Reportedly, the method achieved the performance crite- ria for the analysis of pesticides in cereals specified in EU Regulation 396/2005. Gas liquid chromatography A method for the analysis of pesticides and polychlorinated biphenyls in feed ingredients has been developed, employing a “quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe” (QuEChERS) extraction method. This was fol- lowed by gas liquid chromatogra- phy (GC) involving a programmed temperature vaporizer large-vol- ume injection of the cleaned-up sample, in combination with elec- tron ionization (EI) quadrupole Orbitrap full-scan high-resolution mass spectrometry (GC-EI-Orbitrap HRMS in FS mode). (Tien- stra, M., & Mol, H.G.J., 2018). (Fig.3). “Quadrupole” MS employs four parallel metal rods in the mass analyser. Each opposing rod pair is connected electrically, and a radio frequency (RF) voltage is applied between each pair of rods. Fragment ions travel down the quadrupole between the rods, and only ions of a specific mass-to-charge ratio will reach the detector for a given ra- tio of voltages. The method was successfully validated down to 10 μg kg-1 for multiple-feed matrixes using standard addition. Identification according to European Union requirements was achieved in >90% of the analyte/matrix combinations, and suggestions for further increasing identification rates were made. Herbicides Enzyme linked immunosorbent assay In ELISA methods, the individual components of a sample are not separated prior to analysis. The accurate detection and measurement of individual chemical hazards depends upon the ability of antibodies to specifically target individual compounds. ELISA methods are relatively simple to use and enable the simultaneous determination of multiple sample extracts. (Fig.4). A variety of methods exist including direct, indirect, competi- tive and sandwich ELISAs. Fig. 3: Gas Chromatography Orbitrap™ GC-MS/MS Şekil 3: Gaz Kromatografisi Orbitrap ™ GC-MS / MS